二手液質(zhì)聯(lián)用API LC-MS/MS 串聯(lián)質(zhì)譜及液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)結(jié)合了色譜、質(zhì)譜兩者的優(yōu)點,將色譜的高分離性能和質(zhì)譜的高鑒別特點相結(jié)合,組成了較完美的現(xiàn)代分析技術(shù),近年來在生物醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、環(huán)境檢測、毒物分析等領(lǐng)域發(fā)揮了巨大作用。且隨著現(xiàn)代化高新技術(shù)的不斷發(fā)展及二手液質(zhì)聯(lián)用API LC-MS/MS液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)自身的優(yōu)點,液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)必將在未來幾年不斷發(fā)展且在藥物分析中發(fā)揮越來越重要的作用。
                        

二手液質(zhì)聯(lián)用API LC-MS/MS 檢測硝基呋喃類代謝物的九個步驟如下：

第一步：配制衍生化后的硝基呋喃代謝物標(biāo)準(zhǔn)溶液，乙腈/水體系，濃度10PPM 
確認(rèn)儀器已經(jīng)校準(zhǔn)，氣體、電壓工作正常。 
測試條件： 
離子化方式: ESI+ 
進(jìn)樣5ul/min， Q1 SCAN 觀察M/Z 335，236，249，209及同位素內(nèi)標(biāo)峰，通過調(diào)節(jié)DP，使這幾個峰最強。 
注意：（1）如買來的是已經(jīng)衍生化的標(biāo)準(zhǔn)品，則可四種混配。 
          （2）如是用戶由硝基呋喃代謝物衍生化的，最好四種分別配制，要求Q1 SCAN能明顯觀察到上述離子。

第二步：以第一步測得值為母離子，做PRODUCT ION SCAN（MS2），調(diào)節(jié)CE等參數(shù)，使母，子離子都具有一定強度，平滑后得到MS2譜，從各母離子中各選擇2個最高的子離子，分別為 ：
呋喃它酮AMOZ： M/Z 291，262； 
呋喃唑酮AOZ： M/Z 134，104； 
呋喃妥因AHD： M/Z 134，104或178； 
呋喃西林SEM： M/Z 192，166，準(zhǔn)確到0.1。 
注意：母離子要采用Q1SCAN測得值，子離子采用PRODUCT ION SCAN測得值。
第三步：以第二步選定的離子對，例如335.1/262.2 等，做MRM SCAN ，TIMS值各為50-200ms，強的離子對短些，弱的可長些。 
第四步：通過軟件操作優(yōu)化各種參數(shù)，如溫度、氣流等。

第五步 ：在TUNE欄內(nèi)點擊QUANTITATIVEOPTIMIZATION定量優(yōu)化，只需優(yōu)化 SOURCE/GAS項參數(shù)。
第六步 ：接好色譜柱，編輯LC梯度洗脫，進(jìn)樣，觀察色譜峰形及保留時間是否合適，否則調(diào)節(jié)流動相，優(yōu)化色譜條件。 
第七步 ：用空白提取液配制同樣濃度標(biāo)樣，按上一步方法進(jìn)樣，觀察色譜峰形及保留時間是否合適，峰高有無變化，有無離子抑制現(xiàn)象，否則調(diào)節(jié)流動相，優(yōu)化色譜條件。 
第八步 ：用空白提取液配制一系列不同濃度硝基呋喃代謝物標(biāo)樣，按上一步方法進(jìn)樣，例如，分別稀釋為濃度0.25ug/kg, 0.5ug/kg, 1.0ug/kg, 2.0ug/kg, 4.0ug/kg, 8.0ug/kg, 等等。
第九步：按上述方法采集數(shù)據(jù)，做標(biāo)準(zhǔn)曲線,并進(jìn)行硝基呋喃代謝物樣品的測定。如果4種同位素內(nèi)標(biāo)齊全，則定量時一一對應(yīng)計算，如只有AOZ-D4和AMOZ-D5，則1種內(nèi)標(biāo)可對應(yīng)2種硝基呋喃代謝物。