液相色譜儀HPLC的化學發(fā)光檢測器原理：化學發(fā)光是指在沒有任何光、電、熱的作用下，只是由于反應體系中某種物質(zhì)(反應物、產(chǎn)物、中間體或熒光物質(zhì))的分子吸收了反應所釋放的能量而由基態(tài)躍遷至激發(fā)態(tài),然后再從激發(fā)態(tài)返回基態(tài)，同時將能量以光輻射的形式釋放出來，產(chǎn)生化學發(fā)光的現(xiàn)象。在固相、液相、氣相反應中均能觀察到化學發(fā)光。

由于物質(zhì)激發(fā)態(tài)的能量是來自化學反應，故叫作化學發(fā)光。當分離組分從色譜柱中洗脫出來后，立即與適當?shù)幕瘜W發(fā)光試劑混合，引起化學反應，導致發(fā)光物質(zhì)產(chǎn)生輻射，其光強度與該物質(zhì)的濃度成正比。

液相色譜儀HPLC的化學發(fā)光檢測器不需要光源，也不需要復雜的光學系統(tǒng)，只要有恒流泵，將化學發(fā)光試劑以一定的流速泵入混合器中，使之與柱流出物迅速而又均勻地混合產(chǎn)生化學發(fā)光，通過光電倍增管將光信號變成電信號，就可進行檢測。這種檢測器的最小檢出量可達10～12g。

化學發(fā)光反應的兩個關(guān)鍵步驟: 激發(fā)和發(fā)射。

第一是反應必須能夠提供足夠的激發(fā)能。通常只有那些反應速度相當快的放能反應，其焙變介于170-300kJ/mol之間，才能在可見光范圍內(nèi)觀察到化學發(fā)光現(xiàn)象。

第二是化學反應的能量至少能被一種物質(zhì)所接受并產(chǎn)生激發(fā)態(tài)。

第三是處于激發(fā)態(tài)的分子或原子能夠釋放出光子或者將其能量轉(zhuǎn)移給另一個分子，使此分子激發(fā)，然后以輻射光子的形式回至基態(tài)。

化學反應要產(chǎn)生化學發(fā)光需滿足的條件:

第一，該反應必須能夠提供足夠的能量且可以被某種反應產(chǎn)物或是中間體吸收，使之處于激發(fā)態(tài)，在許多氧化還原反應中所提供的能量都能滿足此條件，因此大多數(shù)氧化還原反應都是化學發(fā)光反應;

第二，化學反應的能量至少能被一種物質(zhì)所接受并使之生成激發(fā)態(tài)。對于有機分子的液相化學發(fā)光而言，從能量上看，容易生成激發(fā)態(tài)產(chǎn)物的往往是一些芳香族化合物和撥基化合物;

第三，處于激發(fā)態(tài)的分子或原子必須具有一定的化學發(fā)光量子效率使其能釋放出光子，或者能夠轉(zhuǎn)移它的能量給另一個分子使之進入激發(fā)態(tài)并釋放出光子。由此可見，能夠用于HPLC柱后檢測的化學發(fā)光是由一些高能量、不放熱、不做電功或其它功的化學反應所釋放的能量，去激發(fā)體系中某些化學物質(zhì)分子而產(chǎn)生的次級光發(fā)射, 利用產(chǎn)生的化學發(fā)光來對經(jīng)色譜分離的被分析化合物進行測定

液相色譜儀HPLC化學發(fā)光檢測器的優(yōu)點

化學發(fā)光檢測器（ CD）是近年來發(fā)展起來的一種快速、靈敏的新型檢測器，具有設備簡單、價格低廉、線性范圍寬等優(yōu)點。
1靈敏度高

2選擇性好，僅對被測組分有響應

3樣品可直接分析，不需要前處理

4新型檢測器

5結(jié)構(gòu)簡單

6線性范圍寬

3. 缺點
使用的反應氣或化學發(fā)光反應產(chǎn)物經(jīng)常是危險性的氣體

在眾多的液相色譜儀HPLC檢測器中，化學發(fā)光檢測器(CLD)結(jié)構(gòu)簡單，靈敏度高。在大多數(shù)情況下，它的靈敏度比紫外一可見光檢測器高2-3個數(shù)量級，由于它沒有光源，不存在散射光引起的背景，用于熒光物質(zhì)檢測時，靈敏度比熒光檢測器更高，對某些物質(zhì)的檢測甚至可與激光誘導熒光檢測器媲美，靈敏度可達10-21mol的單分子水平。將高靈敏度的化學發(fā)光檢測器與高分辨的高效液相色譜(HPLC)分離手段以適當?shù)姆绞较嗟満?，集分離與分析之精華于一體，發(fā)展成為一種理想的分析方法。