利馬前列素，是前列腺素E1的類似物，其主要藥理作用是擴(kuò)張末梢血管，達(dá)到增加血流量以及抑制血小板凝集的目的，對于改善各種局部缺血癥狀，如閉塞性血栓血管炎（TAO）伴發(fā)的潰瘍、疼痛以及發(fā)冷等虛血性癥狀，以及后天性腰椎管狹窄癥伴有的自覺癥狀（下肢疼痛、麻木）和行走能力有十分確切療效，是很有應(yīng)用前景的藥物。

目前關(guān)于列馬前列素的人體藥代動力學(xué)數(shù)據(jù)非常有限，因此建立合適的人體血漿中列馬前列素的檢測方法用于評價其藥代動力學(xué)行為十分必要，但其超低給藥量（15-30ug/Day)以及極低的血漿達(dá)峰濃度（Cmax約為~1pg/mL）對檢測方法的靈敏度提出了極高要求。三重四極桿質(zhì)譜儀的MRM掃描模式憑借其高靈敏度、高選擇性、高特異性一直以來被視為藥代動力學(xué)評價的首選檢測手段，LC-MS/MS方法也被作為常規(guī)定量的黃金標(biāo)準(zhǔn)。

列馬前列素本身為PGE1類似物，而人血漿中含有內(nèi)源性的PGE1及其他多種結(jié)構(gòu)類似物甚至同分異構(gòu)體，這些內(nèi)源性干擾成分是其人體藥代動力學(xué)研究的又一大障礙。由于內(nèi)源性干擾成分與列馬前列素理化性質(zhì)、結(jié)構(gòu)非常相近，單純依靠樣品前處理和簡單的色譜分離已經(jīng)被證明無法有效消除或分離內(nèi)源性干擾。目前為止，多次固相萃?。?/span>SPE）和2D-LC-MS/MS系統(tǒng)是減少或分離內(nèi)源性干擾的主要解決方案。但2D-LC監(jiān)測方法每個樣品需要利馬前列素的人體血漿藥動學(xué)研究至少需要監(jiān)測方法的LLOQ達(dá)到0.3~0.5pg/mL。按照文獻(xiàn)建立的前處理方案相當(dāng)長的分析時間（>50min），通量較低，且2D-LC保留時間的重現(xiàn)性也是眾所周知的問題。另外，2D-LC方法在不同實驗室間的重現(xiàn)、建立及優(yōu)化都需要花費較長時間，限制了2D-LC方法在藥代動力學(xué)中的廣泛應(yīng)用。

通過建立基于新一代離子淌度差分技術(shù)SelexION+和超高靈敏度QTRAP 6500+質(zhì)譜儀測定人血漿中利馬前列素的檢測方法。該方法僅使用簡單的LC分離，避免了2D-LC系統(tǒng)平臺的復(fù)雜、繁瑣及通量低等缺點，單樣本分析時間僅為15min，具有良好的靈敏度及重現(xiàn)性，效率較2D-LC系統(tǒng)提高3倍以上。

試驗結(jié)果：利馬前列素的人體血漿藥動學(xué)研究至少需要檢測方法的LLOQ達(dá)到0.3~0.5pg/ml。按照文獻(xiàn)建立的前處理方案對血漿樣本進(jìn)行三次SPE處理后，僅使用常規(guī)1D-LC-MS/MS系統(tǒng)，高背景噪音（>104cps）以及大量的內(nèi)源性干擾使得方法難以滿足檢測要求。離子淌度差分技術(shù)SelexION在1D-LC基礎(chǔ)上提供了多一維的分離，在母離子進(jìn)入Q1前，根據(jù)待測物離子的化學(xué)結(jié)構(gòu)性質(zhì)不同，通過特定的補償電壓COV進(jìn)行分離，能夠有效地降低或去除背景噪音、分離同分異構(gòu)體，提供較常規(guī)方法更優(yōu)異的選擇性和特異性。

SelexION+技術(shù)是新一代離子淌度差分技術(shù)，與SelexION+相比，離子傳輸效率提升2倍以上。具有比SelexION+更高的靈敏度?；?/span>SelexION+技術(shù)的MRM檢測模式能與超高效液相色譜兼容，即使峰寬<0.1  min的色譜峰，同時檢測12個MRM離子對，也能滿足10個數(shù)據(jù)點以上，保證重現(xiàn)性和靈敏度。

憑借SelexION技術(shù)優(yōu)異的選擇性和QTRAP 6500+超高MRM靈敏度，僅用1D-LC分離，人血漿中利馬前列素的LLOQ可達(dá)0.3pg/ml（以血漿濃度計），并獲得良好的線性和準(zhǔn)確度，完全滿足利馬前列素人體血漿藥代動力學(xué)研究的需要。無需復(fù)雜的2D-LC 系統(tǒng)，彌補了2D-LC 分析時間長，通量低的缺陷，分析效率較2D-LC 系統(tǒng)提高3 倍以上（15 min vs. 50 min），且具有良好的色譜重現(xiàn)性。整個分析流程較2D-LC 大大簡化，適于在不同實驗室間進(jìn)行方法轉(zhuǎn)移、重現(xiàn)。